Dunlaagchromatografie is 'n chemiese analisemetode wat gebaseer is op die gebruik van 'n sorberende laag met 'n dikte van 0,1-0,5 mm as 'n stilstaande fase. Die TLC-metode kan op verskillende terreine gebruik word en maak die bepaling van 'n wye verskeidenheid chemiese verbindings moontlik.
Metode beginsel
Die metode van dunlaagchromatografie is gebore uit papierchromatografie en die eerste eksperimente is in die 80's van die 19de eeu uitgevoer. Die aktiewe gebruik van hierdie analise het eers na 1938 begin.
Die TLC-tegniek bevat 'n mobiele fase (elueermiddel), 'n stilstaande fase (sorbent) en 'n analiet. Die stilstaande fase word aangebring en op 'n spesiale plaat aangebring. Die plaat kan van glas, aluminium of plastiek gemaak word - dit is herbruikbare ondergrond wat deeglik gewas, gedroog en voorberei moet word vir die toediening van die sorbent na elke gebruik. Dit is ook moontlik om papierborde te gebruik wat na gebruik weggegooi word.
Silikagel word meestal as die stilstaande fase gebruik, maar dit is moontlik om ander oplosmiddels te gebruik, byvoorbeeld aluminiumoksied. By die gebruik van die een of ander oplosmiddel moet die tegnologie streng gevolg word sodat die resultaat akkuraat kan wees, byvoorbeeld omdat silikagel 'n verkeerde resultaat kan lewer as die lug in die laboratorium te vogtig is.
Oplosmiddels word as die mobiele fase gebruik, byvoorbeeld water, asynsuur, etanol, asetoon, benseen. Die keuse van 'n oplosmiddel moet op 'n verantwoordelike manier geneem word, want die resultaat van chromatografie hang direk af van die kwaliteit daarvan (viskositeit, digtheid, suiwerheid). 'N Individuele oplosmiddel word gekies vir elke geanaliseerde monster.
Analise
Die monster moet in 'n oplosmiddel verdun word. As volledige oplossing nie plaasvind nie en te veel onsuiwerhede oorbly, kan die monster skoongemaak word deur ekstraksie.
Die aanbring van die monster op die plaat kan outomaties of handmatig gedoen word. Outomatiese toediening gebruik 'n mikrosproei-metode waar elke monster op die toepaslike area van die substraat gespuit word. Vir die handmatige toediening word 'n mikropipet gebruik. Vir elke monster word potloodmerke op die bord geplaas. Elke monster word in 'n lyn met 'n kapillêr op die plaat aangebring op 'n voldoende afstand van die punte om nie met koolstof uit die lood te reageer nie.
Die plaat word in 'n houer geplaas, waaraan die eluent gegiet word. Die steun word met een rand in die vaartuig geplaas tot by die gemerkte lyn. Die vaartuig is dig toe om verdamping van die mobiele fase te voorkom. Onder die werking van kapillêre kragte begin die eluent in die sorberende laag op te staan. Wanneer die eluent 'n sekere vlak bereik, word die plaat uit die houer gehaal en gedroog.
As die gewenste stof geen kleur het nie, sal dit nie op die substraat sigbaar wees nie. Daarom word visualisering uitgevoer - die verwerking van die plaat met jodiumdamp of ander kleurstowwe.
Na sodanige verwerking word die resultaat geëvalueer. Gekleurde areas van verskillende intensiteit verskyn op die sorbent. Om 'n stof (of 'n groep stowwe) te bepaal, word die gekleurde areas, hul grootte, intensiteit en beweeglikheid met 'n verwysingsmonster vergelyk.
Die TLC-metode word wyd gebruik, want dit is vinnig, goedkoop, akkuraat, intuïtief, benodig nie ingewikkelde toerusting nie en is maklik om te interpreteer.
